PRECAUCIÓN: ¡No mezcle ácido nítrico concentrado con disolventes orgánicos!



Foto: cdn.expansion.mx (imagen ilustrativa, no muestra el accidente descrito por los autores)


El radiomarcado con cobre-64 (o cualquier otro radioisótopo de cationes metálicos) se realiza uniendo un grupo quelante de metal a la sonda de interés. El 2006, una investigación de Thaddeus J Wadas y Carolyn J Anderson para publicar un protocolo para radiomarcación de péptidos con cobre-64 que incluía un procedimiento para asegurarse de que los tubos de reacción y las puntas de pipeta usados para la marcación estuvieran libres de cualquier otro metal que pudiera competir con el cobre-64 para la coordinación con el quelante (recuadro 1). Este procedimiento consistió en lavar el equipo con ácido nítrico, seguido de enjuagues con etanol seguido de éter dietílico.


Esto es realmente potencialmente peligroso, y los autores quisieron hacer la siguiente declaración de precaución:


PRECAUCIÓN: Al eliminar los contaminantes de metales traza de las puntas de las pipetas o viales de reacción con ácido nítrico concentrado 1: 1: ddH2O, asegúrese de que no se mezclen inadvertidamente solventes orgánicos como etanol o dietiléter con los residuos de ácido nítrico. Una explosión ocurrió cuando esto ocurrió en un laboratorio usando este procedimiento. Afortunadamente, nadie resultó herido.


De hecho, es posible (y aconsejable) no utilizar disolventes orgánicos para este proceso en absoluto. El texto del recuadro 1 debería leer:


Recuadro 1 | ELIMINACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN METÁLICA


Trabajar a nivel de traza requiere que los reactivos y los recipientes utilizados sean lo más libres posible de metales traza. Para conseguir esto, las puntas de pipeta, los tubos de reacción y las tapas pueden lavarse con ácido siguiendo los pasos a continuación.


Alternativamente, se pueden comprar tubos de reacción y puntas de pipeta libre de metales.


Eliminación de contaminantes metálicos traza de tubos de reacción, tapas y puntas


1. Sumerja los tubos y las tapas o las puntas en una mezcla 1:1 de ácido nítrico concentrado

y ddH2O (mayor de 18 MΩ de resistividad) durante varias horas con mezclando periódicamente y luego drene.


2. Enjuague los tubos con ddH2O y drene.


<PRECAUCIÓN> Se recomienda que no se utilicen etanol o éter dietílico para ayudar a secar los tubos, ya que incluso pequeñas cantidades de estos disolventes orgánicos mezclados con ácido nítrico ddH2O 1: 1 pueden causar una explosión.


3. Colocar en un recipiente y secar en una estufa a temperaturas inferiores de 50 °C.


Eliminación de los contaminantes de metales traza de los tampones de reacción y otras soluciones


1. Preparar la(s) solución(es) o tampón(es) a utilizar.

2. Añadir solución Chelex (10 g/L) a estas soluciones.

3. Agitar durante varias horas o durante la noche a temperatura ambiente.

4. Filtrar a través de un sistema de filtro Corning de 1 litro (tamaño de poro de 0,2 mm).


Fuente:


NATURE PROTOCOLS | 17 October 2013


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